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减肥肽对导致肥胖大鼠体重及体脂的探讨
摘要：
由大豆多肽、左旋肉碱、丙酮酸钙及荷叶配方组成的减肥肽，具有显著降低降低高脂饮食导致肥胖大鼠体重和体脂的作用，经安全实验证实为实际无毒食品。该项研究有利于新一代减肥保健品的开发。
关键词：大豆多肽 左旋肉碱 丙酮酸钙 肥胖
减肥肽是本研究所新开发出的多肽类减肥产品，其主要组成为大豆多肽、肉碱、丙酮酸钙和荷叶粉。大豆多肽有促进脂肪代谢和减肥效果,丙酮酸钙具有加速三羧酸循环，促进ATP的合成，减少体内储存脂肪的功能；左旋肉碱能转运活化脂肪酸进入线粒体，增强脂肪β-氧化，促进脂肪代谢，产生减肥作用。荷叶粉具有减少脂肪吸收，润肠通便的作用。本实验按上述原料配成减肥肽，观察对大鼠的减肥作用，并对该产品进行了安全性实验观察。
1. 材料和方法
1.1药品与试剂：猪胆盐和胆固醇为北京海淀区微生物培养基制品厂生产，蛋黄粉和猪油购自市场，减肥肽为本公司科研所研发产品。
1.2 动物：SD大鼠为华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。
1.3 高脂饲料配方：将基础饲料粉末75.3%、蛋黄粉12%、胆盐0.2%、胆
固醇0.5%、猪油12%共7kg混合均匀，加适量的水制成块状，烘干至一定程度即可作为高脂饲料。
1.4 肥胖模型的制备：取40只大鼠，雌雄各半，随机分为四组，每组10
只。1组为普通饮食对照组（喂食基础饲料）；2组为高脂饮食对照组；以上两组不喂减肥肽。3组为普通饮食减肥肽实验组；4组为高脂饮食减肥肽实验组。实验组减肥肽灌胃前，在25℃下饲养4周形成肥胖模型，减肥肽灌胃实验中每隔7天称其空腹12小时体重，观察体重变化。
1.5 减肥肽灌胃量及方式：减肥肽成人剂量为5.22g/60kg.bd.d，按成人的20倍剂量喂食大鼠, 即大鼠体重每100 g每天给减肥肽0.176 g。每天灌胃2次，连续4周。实验于第4周后进行组间及自身实验数据统计。
1.6 急性毒性实验：
1.6.1 动物：SD大鼠12只，雌雄各半，体重180~220g。分为两组,每组3雄3雌。
1.6.2 剂量及服用方式：剂量为10.00g/kg.bw。被试动物经停食15小时后，将溶于水中的减肥肽经口灌于胃中。其中1组为一次性灌胃，另1组灌胃分两次进行，相隔时间2小时。
1.6.3 观察指标：连续观察2周，记录各组动物的中毒反应情况和死亡只数。
1.7 体脂的测量： 另取对照组及减肥肽实验组各10只雌性大鼠。两组动物均喂饲高脂饮食。每周检测动物空腹12小时后体重一次，4周后分离、取出大鼠肾周围及大网膜脂肪，分别在万分之一电子天平称重，与对照组进行统计比较。
2 结 果
2.1 减肥肽急性毒性实验： 观察期间，各组动物均未发现有任何中毒反应。在2周观测期间动物无呕吐、腹泻等症状，饮食、体重均在正常范围。2周内无一例动物死亡，见表1
表1 减肥肽对大鼠的急性毒性实验结果
组别与剂量 性别 受试物 动物数 服用途径 动物反应 死亡数 结论LD50：
（g/kg.bw） （只） 及方式 （只） （g/kg.bw）
10.00 雄 减肥肽 3 一次性灌胃 正常 0
10.00 雌 减肥肽 3 一次性灌胃 正常 0
> 10.00
10.00 雄 减肥肽 3 分两次灌胃 正常 0
10.00 雌 减肥肽 3 分两次灌胃 正常 0
2.2 减肥肽灌胃组及对照组大鼠各组间体重变化
普通饮食减肥肽组及高脂饮食减肥肽组灌胃4周后，与相应对照组比较，体重变化值见表2和图1。
表2 给药各组及对照组大鼠各组间体重变化值 （单位：克； 每组动物10只）
普通饮食 高脂饮食 普通饮食 高脂饮食
对照组 对照组 减肥肽组 减肥肽组
初始体重 287.6±10.2 287.8±9.2 312.0±72.1 328.0±77.4
4周后平均体重 329.3±14.5 332.0±12.7 298.0±61.4 315.9±72.6
体重变化平均值 +41.6±11.7 +44.2±11.1 +3.3±12.7 -9.6±22.75
体重变化/每日 +1.39g +1.47g + 0.11g - 0.32g
动物数 10 10 10 10
t检验 p<0.001* p<0.001**
*与普通饮食对照组比较p<0.001。 **与高脂饮食对照组比较p<0.001。
图1. 1：普通饮食组与普通饮食灌胃组30天后体重变化值
2：高脂饮食组与高脂饮食灌胃组30天后体重变化值
[注] 兰色柱为对照组值，棕色柱为实验组值
2.3 减肥肽灌胃前及灌胃后大鼠自身体重变化
观察了实验前4周喂食普通饲料及高脂饲料大鼠体重增长情况，并计算平均每日体重增长值，随后给上述动物减肥肽灌胃4周，并计算各组大鼠灌胃4周后平均每日体重变化。每只大鼠实验前后自身体重变化值及t检验结果见表3。
表3 灌胃前及灌胃后4周大鼠自身体重变化 （单位：克）
普通饮食组 高脂饮食组
灌胃前平均 灌胃后平均 灌胃前平均 灌胃后平均
每天增长体重 每天增长体重 每天增长体重 每天增长体重
由大豆多肽、左旋肉碱、丙酮酸钙及荷叶配方组成的减肥肽，具有显著降低降低高脂饮食导致肥胖大鼠体重和体脂的作用，经安全实验证实为实际无毒食品。该项研究有利于新一代减肥保健品的开发。
关键词：大豆多肽 左旋肉碱 丙酮酸钙 肥胖
减肥肽是本研究所新开发出的多肽类减肥产品，其主要组成为大豆多肽、肉碱、丙酮酸钙和荷叶粉。大豆多肽有促进脂肪代谢和减肥效果,丙酮酸钙具有加速三羧酸循环，促进ATP的合成，减少体内储存脂肪的功能；左旋肉碱能转运活化脂肪酸进入线粒体，增强脂肪β-氧化，促进脂肪代谢，产生减肥作用。荷叶粉具有减少脂肪吸收，润肠通便的作用。本实验按上述原料配成减肥肽，观察对大鼠的减肥作用，并对该产品进行了安全性实验观察。
1. 材料和方法
1.1药品与试剂：猪胆盐和胆固醇为北京海淀区微生物培养基制品厂生产，蛋黄粉和猪油购自市场，减肥肽为本公司科研所研发产品。
1.2 动物：SD大鼠为华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。
1.3 高脂饲料配方：将基础饲料粉末75.3%、蛋黄粉12%、胆盐0.2%、胆
固醇0.5%、猪油12%共7kg混合均匀，加适量的水制成块状，烘干至一定程度即可作为高脂饲料。
1.4 肥胖模型的制备：取40只大鼠，雌雄各半，随机分为四组，每组10
只。1组为普通饮食对照组（喂食基础饲料）；2组为高脂饮食对照组；以上两组不喂减肥肽。3组为普通饮食减肥肽实验组；4组为高脂饮食减肥肽实验组。实验组减肥肽灌胃前，在25℃下饲养4周形成肥胖模型，减肥肽灌胃实验中每隔7天称其空腹12小时体重，观察体重变化。
1.5 减肥肽灌胃量及方式：减肥肽成人剂量为5.22g/60kg.bd.d，按成人的20倍剂量喂食大鼠, 即大鼠体重每100 g每天给减肥肽0.176 g。每天灌胃2次，连续4周。实验于第4周后进行组间及自身实验数据统计。
1.6 急性毒性实验：
1.6.1 动物：SD大鼠12只，雌雄各半，体重180~220g。分为两组,每组3雄3雌。
1.6.2 剂量及服用方式：剂量为10.00g/kg.bw。被试动物经停食15小时后，将溶于水中的减肥肽经口灌于胃中。其中1组为一次性灌胃，另1组灌胃分两次进行，相隔时间2小时。
1.6.3 观察指标：连续观察2周，记录各组动物的中毒反应情况和死亡只数。
1.7 体脂的测量： 另取对照组及减肥肽实验组各10只雌性大鼠。两组动物均喂饲高脂饮食。每周检测动物空腹12小时后体重一次，4周后分离、取出大鼠肾周围及大网膜脂肪，分别在万分之一电子天平称重，与对照组进行统计比较。
2 结 果
2.1 减肥肽急性毒性实验： 观察期间，各组动物均未发现有任何中毒反应。在2周观测期间动物无呕吐、腹泻等症状，饮食、体重均在正常范围。2周内无一例动物死亡，见表1
表1 减肥肽对大鼠的急性毒性实验结果
组别与剂量 性别 受试物 动物数 服用途径 动物反应 死亡数 结论LD50：
（g/kg.bw） （只） 及方式 （只） （g/kg.bw）
10.00 雄 减肥肽 3 一次性灌胃 正常 0
10.00 雌 减肥肽 3 一次性灌胃 正常 0
> 10.00
10.00 雄 减肥肽 3 分两次灌胃 正常 0
10.00 雌 减肥肽 3 分两次灌胃 正常 0
2.2 减肥肽灌胃组及对照组大鼠各组间体重变化
普通饮食减肥肽组及高脂饮食减肥肽组灌胃4周后，与相应对照组比较，体重变化值见表2和图1。
表2 给药各组及对照组大鼠各组间体重变化值 （单位：克； 每组动物10只）
普通饮食 高脂饮食 普通饮食 高脂饮食
对照组 对照组 减肥肽组 减肥肽组
初始体重 287.6±10.2 287.8±9.2 312.0±72.1 328.0±77.4
4周后平均体重 329.3±14.5 332.0±12.7 298.0±61.4 315.9±72.6
体重变化平均值 +41.6±11.7 +44.2±11.1 +3.3±12.7 -9.6±22.75
体重变化/每日 +1.39g +1.47g + 0.11g - 0.32g
动物数 10 10 10 10
t检验 p<0.001* p<0.001**
*与普通饮食对照组比较p<0.001。 **与高脂饮食对照组比较p<0.001。
图1. 1：普通饮食组与普通饮食灌胃组30天后体重变化值
2：高脂饮食组与高脂饮食灌胃组30天后体重变化值
[注] 兰色柱为对照组值，棕色柱为实验组值
2.3 减肥肽灌胃前及灌胃后大鼠自身体重变化
观察了实验前4周喂食普通饲料及高脂饲料大鼠体重增长情况，并计算平均每日体重增长值，随后给上述动物减肥肽灌胃4周，并计算各组大鼠灌胃4周后平均每日体重变化。每只大鼠实验前后自身体重变化值及t检验结果见表3。
表3 灌胃前及灌胃后4周大鼠自身体重变化 （单位：克）
普通饮食组 高脂饮食组
灌胃前平均 灌胃后平均 灌胃前平均 灌胃后平均
每天增长体重 每天增长体重 每天增长体重 每天增长体重
